БИОТИН-МАЛЕИМИД

Описание

Биотин-малеимид — гетеробифункциональный реагент биотинилирования, сочетающий остаток биотина с малеимидной группой, специфичной к тиольным (–SH) группам. CAS 116919-18-7, формула C20H29N5O5S, молекулярный вес 451,54, точная масса 451,189. Молекула построена из трёх функциональных блоков: бициклической биотиновой головки, узнаваемой стрептавидином и авидином, гидрофильного спейсера, удаляющего малеимидную группу от объёмного биотинового ядра и снижающего стерические затруднения при связывании с целевым белком, и собственно малеимидного электрофильного центра на конце молекулы.

Основные атрибуты

• CAS №: 116919-18-7
• Химическая формула: C20H29N5O5S
• Молекулярный вес: 451,54; точная масса: 451,189
• HS code: 29349990
• Характеристики PSA: 162
• XLogP3: -0,1

Физико-химические характеристики

• Внешний вид: порошок
• Плотность: 1,286
• Температура кипения: 825,0 ± 60,0 °C (прогнозируемая)
• Растворимость: в уксусной кислоте 20 мг/мл
• Условия хранения: 2–8 °C

Область применения

Малеимидная группа реагента селективно вступает в реакцию присоединения по Михаэлю со свободными тиольными группами остатков цистеина в белках и пептидах, ковалентно присоединяя биотиновую метку к молекуле-мишени. Полученный биотинилированный конъюгат затем детектируется или очищается через высокоаффинное связывание биотина со стрептавидином или авидином. Реагент широко используется в биоконъюгации, иммуноферментном анализе (ИФА), вестерн-блоттинге, аффинной очистке белков и создании биотин-стрептавидиновых сенсоров, где требуется мягкая и селективная модификация тиольных групп без затрагивания аминов и других нуклеофильных центров белка. Тиол-специфичность малеимидной химии особенно ценна при мечении рекомбинантных белков с единственным доступным остатком цистеина, введённым сайт-направленным мутагенезом — в этом случае реакция даёт гомогенный, точно локализованный конъюгат вместо смеси продуктов, характерной для амин-реактивных меток типа NHS-эфиров.

Информация по технике безопасности

• WGK Германия: 3

Хранение и транспортировка

Хранить при температуре 2–8 °C, в герметичной таре, защищённой от света и влаги — малеимидная группа реагента гидролитически неустойчива и постепенно теряет реакционную способность при хранении в водных растворах или при повышенной влажности. Реагент чувствителен к присутствию свободных тиолов в среде хранения, поэтому рабочие растворы готовят непосредственно перед использованием. Буферные растворы для конъюгации подбирают в диапазоне pH 6,5–7,5, где реакция с тиолами протекает селективно и быстро, тогда как при более высоких значениях pH возрастает риск побочного гидролиза малеимидного кольца и снижения выхода целевого конъюгата, что важно учитывать при масштабировании протоколов мечения белков в исследовательских и производственных биохимических лабораториях.